《植物生理学报》 2008, 44(4): 710-714

甜菜胞质型谷氨酰胺合成酶基因组DNA 的克隆

康传红¹, 王淑春¹, 陈胜勇², 李彩凤^2,*

1 黑龙江大学生命科学学院, 哈尔滨150080; 2 东北农业大学农学院, 哈尔滨150030

通信作者：李彩凤；E-mail: licaifeng1965@yahoo.com.cn；Tel: 0451-55190854

摘　要：

以甜菜叶片为材料, 用CTAB法提取基因组DNA。以分段PCR法扩增得到了完整的甜菜胞质型谷氨酰胺合成酶(GS1) 基因组 DNA。采用 RT-PCR 法扩增此 GS1 基因(GS1)的 cDNA 序列应用于对照。获得了长度为 9 606 bp 的完整的GS1 DNA 序列和长度为 1 068 bp 的 GS1 cDNA 序列。分析 GS1 基因组 DNA 序列表明, 它包含 13 个外显子, 被 12 个内含子分隔开。 其外显子区与已公布的 GS1 mRNA 序列的相似性达 99.5%。RT-PCR 法获得的 cDNA 序列与已知的 GS1 mRNA 序列相似 性达 99.6%。而 2 次实验中 GS1 基因组 DNA 外显子区与 GS1 cDNA 序列的相似性达99.9%。GenBank 登录号为EU370974。

关键词：甜菜; 谷氨酰胺合成酶; 基因克隆

收稿：2008-04-30   修定：2008-05-28

资助：国家自然科学基金(30471017, 30771276)和黑龙江省博士后科研启动基金(BSH-Q06103)。

甜菜胞质型谷氨酰胺合成酶基因组DNA 的克隆

康传红¹, 王淑春¹, 陈胜勇², 李彩凤^2,*

1 黑龙江大学生命科学学院, 哈尔滨150080; 2 东北农业大学农学院, 哈尔滨150030

Corresponding author: ; E-mail: licaifeng1965@yahoo.com.cn; Tel: 0451-55190854

Abstract:

以甜菜叶片为材料, 用CTAB法提取基因组DNA。以分段PCR法扩增得到了完整的甜菜胞质型谷氨酰胺合成酶(GS1) 基因组 DNA。采用 RT-PCR 法扩增此 GS1 基因(GS1)的 cDNA 序列应用于对照。获得了长度为 9 606 bp 的完整的GS1 DNA 序列和长度为 1 068 bp 的 GS1 cDNA 序列。分析 GS1 基因组 DNA 序列表明, 它包含 13 个外显子, 被 12 个内含子分隔开。 其外显子区与已公布的 GS1 mRNA 序列的相似性达 99.5%。RT-PCR 法获得的 cDNA 序列与已知的 GS1 mRNA 序列相似 性达 99.6%。而 2 次实验中 GS1 基因组 DNA 外显子区与 GS1 cDNA 序列的相似性达99.9%。GenBank 登录号为EU370974。

Key words: 甜菜; 谷氨酰胺合成酶; 基因克隆